अलग कर रहा है

साल्टिंग आउट (नमक-प्रेरित वर्षा, नमक विभाजन, विरोधी विलायक क्रिस्टलीकरण, वर्षा क्रिस्टलीकरण, या डूबने के रूप में भी जाना जाता है)^[1] एक शोधन तकनीक है जो बहुत उच्च आयनिक शक्ति के समाधान में कुछ अणुओं की कम घुलनशीलता का उपयोग करती है। साल्टिंग आउट का उपयोग आमतौर पर प्रोटीन या डीएनए जैसे बड़े बायोमोलेक्यूल्स को अवक्षेपित करने के लिए किया जाता है।^[2] क्योंकि किसी दिए गए प्रोटीन के घोल (रसायन विज्ञान) से अवक्षेपित करने के लिए आवश्यक नमक सांद्रता प्रोटीन से प्रोटीन में भिन्न होती है, एक विशिष्ट नमक एकाग्रता का उपयोग लक्ष्य प्रोटीन को अवक्षेपित करने के लिए किया जा सकता है। इस प्रक्रिया का उपयोग प्रोटीन के तनु विलयनों को केंद्रित करने के लिए भी किया जाता है। जरूरत पड़ने पर नमक को हटाने के लिए डायलिसिस (जैव रसायन) का इस्तेमाल किया जा सकता है।

सिद्धांत

नमक के यौगिक जलीय घोल में अलग हो जाते हैं। इस संपत्ति का उपयोग नमकीन बनाने की प्रक्रिया में किया जाता है। जब नमक की सघनता बढ़ जाती है, तो solation, जो प्रोटीन के आवेशित भाग के साथ बातचीत करने के लिए उपलब्ध पानी के अणुओं की संख्या को कम कर देता है।^[3]

साल्टिंग इन और साल्टिंग आउट तकनीक का सिद्धांत, नमक की सघनता बढ़ाने पर आधारित है।

प्रोटीन अणुओं में जल विरोधी एमिनो एसिड और हाइड्रोफिलिक अमीनो एसिड होते हैं।

जलीय घोल में प्रोटीन तह के बाद, हाइड्रोफोबिक अमीनो एसिड आमतौर पर संरक्षित हाइड्रोफोबिक क्षेत्रों का निर्माण करते हैं, जबकि हाइड्रोफिलिक अमीनो एसिड सॉल्वैंशन के अणुओं के साथ बातचीत करते हैं और प्रोटीन को आसपास के पानी के अणुओं के साथ हाइड्रोजन बांड बनाने की अनुमति देते हैं। यदि प्रोटीन की पर्याप्त सतह हाइड्रोफिलिक है, तो प्रोटीन को पानी में घोला जा सकता है।^[4] जब नमक को घोल में डाला जाता है, तो विलायक के अणुओं और नमक आयनों के बीच अधिक बार बातचीत होती है। नतीजतन, प्रोटीन और नमक आयन विलायक अणुओं के साथ बातचीत करने के लिए प्रतिस्पर्धा करते हैं जिसके परिणामस्वरूप प्रोटीन अणुओं के साथ बातचीत के लिए पहले की तुलना में कम विलायक अणु उपलब्ध होते हैं। प्रोटीन-प्रोटीन इंटरैक्शन इस प्रकार सॉल्वेंट-विलेय इंटरैक्शन से अधिक मजबूत हो जाते हैं और प्रोटीन अणु एक दूसरे के साथ हाइड्रोफोबिक इंटरैक्शन बनाकर जुड़ जाते हैं।^[5] किसी दिए गए विलायक में पृथक्करण के बाद, एक चुने हुए नमक से नकारात्मक रूप से चार्ज किए गए परमाणु समाधान में मौजूद सकारात्मक रूप से चार्ज किए गए अणुओं के साथ बातचीत के लिए प्रतिस्पर्धा करना शुरू कर देते हैं। इसी तरह, सकारात्मक रूप से आवेशित धनायन विलायक के ऋणात्मक रूप से आवेशित अणुओं के साथ परस्पर क्रिया के लिए प्रतिस्पर्धा करते हैं। इस प्रक्रिया को साल्टिंग आउट के रूप में जाना जाता है।^{[citation needed]}

सांद्र नमक के घोल से साबुन आसानी से अवक्षेपित हो जाते हैं, नमक में धातु आयन फैटी एसिड के साथ प्रतिक्रिया करता है जो साबुन और ग्लिसरॉल को वापस बनाता है। ग्लिसरीन को साबुन से अलग करने के लिए, पेस्टी उबलते द्रव्यमान को ब्राइन (NaCl समाधान) के साथ इलाज किया जाता है। केटल नमक की सामग्री एक ऊपरी परत में अलग (अलग) होती है जो कि अशुद्ध साबुन का एक गाढ़ा द्रव्यमान है और एक निचली परत जिसमें ग्लिसरीन के साथ जलीय नमक का घोल होता है। थोड़ा क्षारीय नमक समाधान, जिसे स्पेंट लाइ कहा जाता है, पैन या केतली के नीचे से निकाला जाता है और बाद में ग्लिसरीन रिकवरी के लिए इलाज किया जा सकता है।^{[citation needed]}

आवेदन

जैसा कि विभिन्न प्रोटीनों में अमीनो एसिड की अलग-अलग रचनाएँ होती हैं, विभिन्न प्रोटीन अणु नमक के घोल की अलग-अलग सांद्रता में अवक्षेपित होते हैं।^{[citation needed]}

जब तक नमक के घोल की विभिन्न सांद्रता में प्रोटीन की घुलनशीलता ज्ञात हो, तब तक अवांछित प्रोटीन को प्रोटीन घोल के मिश्रण से बाहर निकाला जा सकता है। छानने का काम या centrifugation द्वारा अवक्षेप को हटाने के बाद, वांछित प्रोटीन को नमक की सघनता को उस स्तर तक बदलकर अवक्षेपित किया जा सकता है जिस पर वांछित प्रोटीन अघुलनशील हो जाता है।^[6] प्रोटीन के शुद्धिकरण में साल्टिंग का एक दोष यह है कि रुचि के एक विशिष्ट प्रोटीन को अवक्षेपित करने के अलावा, दूषित पदार्थ भी अवक्षेपित होते हैं। इस प्रकार ब्याज की एक शुद्ध प्रोटीन प्राप्त करने के लिए, अतिरिक्त शुद्धिकरण विधियों जैसे आयन एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी की आवश्यकता हो सकती है।^[7]

यह भी देखें

संदर्भ

↑ Genck, Wayne (2010). "अधिकांश एंटीसॉल्वेंट क्रिस्टलाइजेशन बनाएं". Chemical Processing. PutmanMedia.
↑ Chacon-Cortes, D; Griffiths, L (4 December 2020). "Methods for extracting genomic DNA from whole blood samples: current perspectives". Journal of Biorepository Science for Applied Medicine. 2014 (2): 1–9. doi:10.2147/BSAM.S46573.
↑ Arakawa, Tsutomu; Timasheff, Serge N. (December 1984). "Mechanism of protein salting in and salting out by divalent cation salts: balance between hydration and salt binding". Biochemistry. 23 (25): 5912–5923. doi:10.1021/bi00320a004. PMID 6525340.
↑ Qiao, Baofu; Jiménez-Ángeles, Felipe; Nguyen, Trung Dac; Olvera de la Cruz, Monica (24 September 2019). "पानी ध्रुवीय और गैर-ध्रुवीय प्रोटीन सतह डोमेन का अनुसरण करता है". Proceedings of the National Academy of Sciences. 116 (39): 19274–19281. doi:10.1073/pnas.1910225116. PMC 6765241. PMID 31501317.
↑ Novák, P.; Havlíček, V. (2016). "Protein Extraction and Precipitation". प्रोटिओमिक रूपरेखा और विश्लेषणात्मक रसायन विज्ञान. pp. 51–62. doi:10.1016/B978-0-444-63688-1.00004-5. ISBN 978-0-444-63688-1.
↑ Wingfield, Paul (September 1998). "अमोनियम सल्फेट का उपयोग कर प्रोटीन अवक्षेपण". Current Protocols in Protein Science. Appendix 3: A.3F.1–A.3F.8. doi:10.1002/0471140864.psa03fs13. ISBN 0471140864. PMC 4817497. PMID 18429073.
↑ Duong-Ly, Krisna C.; Gabelli, Sandra B. (2014). "Salting out of Proteins Using Ammonium Sulfate Precipitation". Laboratory Methods in Enzymology: Protein Part C. Methods in Enzymology. Vol. 541. pp. 85–94. doi:10.1016/B978-0-12-420119-4.00007-0. ISBN 978-0-12-420119-4. PMID 24674064.

अग्रिम पठन

Sheehan, David (2009). Physical Biochemistry: Principles and Applications. John Wiley & Sons. p. 285. ISBN 978-0-470-85602-4.
Miller, S A; Dykes, D D; Polesky, H F (11 February 1988). "A simple salting out procedure for extracting DNA from human nucleated cells". Nucleic Acids Research. 16 (3): 1215. CiteSeerX 10.1.1.941.1917. doi:10.1093/nar/16.3.1215. PMC 334765. PMID 3344216.
McKay, H. A. C. (1 January 1953). "Activities and activity coefficients in ternary systems". Transactions of the Faraday Society. 49: 237–242. doi:10.1039/TF9534900237.

बाहरी संबंध

Make The Most of Antisolvent Crystallization
Salting out on UC Davis ChemWiki

[1] Genck, Wayne (2010). "अधिकांश एंटीसॉल्वेंट क्रिस्टलाइजेशन बनाएं". Chemical Processing. PutmanMedia.

[2] Chacon-Cortes, D; Griffiths, L (4 December 2020). "Methods for extracting genomic DNA from whole blood samples: current perspectives". Journal of Biorepository Science for Applied Medicine. 2014 (2): 1–9. doi:10.2147/BSAM.S46573.

[3] Arakawa, Tsutomu; Timasheff, Serge N. (December 1984). "Mechanism of protein salting in and salting out by divalent cation salts: balance between hydration and salt binding". Biochemistry. 23 (25): 5912–5923. doi:10.1021/bi00320a004. PMID 6525340.

[4] Qiao, Baofu; Jiménez-Ángeles, Felipe; Nguyen, Trung Dac; Olvera de la Cruz, Monica (24 September 2019). "पानी ध्रुवीय और गैर-ध्रुवीय प्रोटीन सतह डोमेन का अनुसरण करता है". Proceedings of the National Academy of Sciences. 116 (39): 19274–19281. doi:10.1073/pnas.1910225116. PMC 6765241. PMID 31501317.

[5] Novák, P.; Havlíček, V. (2016). "Protein Extraction and Precipitation". प्रोटिओमिक रूपरेखा और विश्लेषणात्मक रसायन विज्ञान. pp. 51–62. doi:10.1016/B978-0-444-63688-1.00004-5. ISBN 978-0-444-63688-1.

[6] Wingfield, Paul (September 1998). "अमोनियम सल्फेट का उपयोग कर प्रोटीन अवक्षेपण". Current Protocols in Protein Science. Appendix 3: A.3F.1–A.3F.8. doi:10.1002/0471140864.psa03fs13. ISBN 0471140864. PMC 4817497. PMID 18429073.

[7] Duong-Ly, Krisna C.; Gabelli, Sandra B. (2014). "Salting out of Proteins Using Ammonium Sulfate Precipitation". Laboratory Methods in Enzymology: Protein Part C. Methods in Enzymology. Vol. 541. pp. 85–94. doi:10.1016/B978-0-12-420119-4.00007-0. ISBN 978-0-12-420119-4. PMID 24674064.

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