सूक्ष्मजीवविज्ञानी संवर्धन

ठोस और तरल मीडिया पर सूक्ष्मजीवीय संवर्धन

एक सूक्ष्मजीवविज्ञानी संवर्धन, या कीटाणु-विज्ञान संवर्धन, सूक्ष्मजीवों को नियंत्रित प्रयोगशाला स्थितियों के अंतर्गत पूर्व निर्धारित संवर्धन मीडिया में पुन: उत्पन्न करने की एक विधि है। सूक्ष्मजीवीय संवर्धन आणविक जीव विज्ञान में एक शोध उपकरण के रूप में उपयोग की जाने वाली मूलभूत और बुनियादी नैदानिक ​​​​पद्धतियां हैं।

'संवर्धन' शब्द भी उगाए जा रहे सूक्ष्मजीवों को संदर्भित कर सकता है।

सूक्ष्मजीवीय संवर्धनों का उपयोग जीव के प्रकार, परीक्षण किए जा रहे नमूने में इसकी बहुतायत, या दोनों को निर्धारित करने के लिए किया जाता है। यह सूक्ष्म जीव विज्ञान के प्राथमिक नैदानिक ​​​​तरीकों में से एक है और कर्मक को पूर्व निर्धारित माध्यम में गुणा करके संक्रामक बीमारी के कारण को निर्धारित करने के लिए एक उपकरण के रूप में उपयोग किया जाता है। उदाहरण के लिए, गले के पिछले हिस्से में ऊतक की परत को खुरच कर और नमूने को एक माध्यम में सोख कर गले के संवर्धन को लिया जाता है, ताकि स्ट्रेप गले के प्रेरक कर्मक 'स्ट्रेप्टोकोकस प्योगेनेस', जैसे हानिकारक सूक्ष्मजीवों की जांच की जा सके। इसके अतिरिक्त, प्रयोगशाला में एक विशिष्ट प्रकार के सूक्ष्मजीव को "चुनिंदा रूप से विकसित करने" के संदर्भ में संवर्धन शब्द का उपयोग सामान्यतः अनौपचारिक रूप से किया जाता है।

सूक्ष्मजीवों के शुद्ध संवर्धन को अलग करना प्रायः आवश्यक होता है। एक शुद्ध (या अक्षीय) संवर्धन अन्य प्रजातियों या प्रकारों की अनुपस्थिति में बढ़ने वाली कोशिकाओं (जीव विज्ञान) या बहुकोशिकीय जीवों की आबादी है। एक शुद्ध संवर्धन की उत्पत्ति एक कोशिका या एकल जीव से हो सकती है, इस स्थिति में कोशिकाएँ एक दूसरे के आनुवंशिक प्रतिरूप हैं। सूक्ष्मजीवीय संवर्धन का जैलन करने के लिए एग्रोज जेल (अगार ) के माध्यम का उपयोग किया जाता है। अगार एक जेली जैसा पदार्थ है जो समुद्री शैवाल से प्राप्त होता है। अगार का एक सस्ता विकल्प ग्वार गम है, जिसका उपयोग तापरागी के पृथक्करण और रखरखाव के लिए किया जा सकता है।

जीवाणु संवर्धन

बेसिलस एन्थ्रेसिस की एक संवर्धन

कई प्रकार के जीवाणु संवर्धन तरीके हैं जिनका चयन कर्मक के सुसंस्कृत होने और अनुप्रवाह उपयोग के आधार पर किया जाता है।

शोरबा संवर्धन

Main article: पोषक तत्व अगार

बैक्टीरियल संवर्धन की एक विधि द्रव्य संवर्धन है, जिसमें वांछित जीवाणु को तरल पोषक तत्व के माध्यम में निलंबित कर दिया जाता है, जैसे एक सीधे फ्लास्क में लुरिया शोरबा। यह एक वैज्ञानिक को विभिन्न अनुप्रवाह अनुप्रयोगों के लिए बड़ी मात्रा में जीवाणु विकसित करने की अनुमति देता है।

द्रव्य संवर्धन एक रोगाणुरोधी परख की तैयारी के लिए आदर्श होते हैं जिसमें द्रव्य शोरबा जीवाणु के साथ निवेशित किया जाता है और रात भर बढ़ने दिया जाता है (एक समान विकास को प्रोत्साहित करने के लिए यांत्रिक रूप से शोरबा को मिलाने के लिए 'हल्लित्र' का उपयोग किया जा सकता है)। इसके बाद, एक विशिष्ट दवा या प्रोटीन (रोगाणुरोधी पेप्टाइड्स) की रोगाणुरोधी गतिविधि के परीक्षण के लिए नमूने के विभाज्य लिया जाता है।

साइनोबैक्टीरीयम सिंटिकोकोकस पीसीसी 7002 की द्रव्य संवर्धन

एक विकल्प के रूप में स्थिर द्रव्य संवर्धनों का उपयोग किया जा सकता है। इन संवर्धनों को हिलाया नहीं जाता है, और वे सूक्ष्म जीवों को ऑक्सीजन प्रवणता प्रदान करते हैं।

आगर प्लेटें

सूक्ष्मजैविक संवर्धनों को अलग-अलग आकार के पेट्री बर्तनों में उगाया जा सकता है, जिसमें अगार -आधारित विकास माध्यम की पतली परत होती है। एक बार पेट्री डिश में वृद्धि के माध्यम को वांछित जीवाणुओं के साथ टीका लगाया जाता है, तो प्लेटों को चयनित जीवाणुओं के बढ़ने के लिए इष्टतम तापमान पर ऊष्मायन किया जाता है (उदाहरण के लिए, सामान्यतः 37 डिग्री सेल्सियस, या मानव शरीर के तापमान पर, मनुष्यों से संवर्धनों के लिए या जानवर, या पर्यावरण संवर्धनों के लिए कम)। वृद्धि के वांछित स्तर को प्राप्त करने के बाद, भविष्य के प्रयोगों के लिए जीवाणुओं को रखने के लिए एक विस्तृत अवधि के लिए अगार प्लेटों को प्रशीतित्र में उल्टा रखा जा सकता है।

ऐसे कई प्रकार के योजक हैं जिन्हें प्लेट में डालने और जमने देने से पहले अगार में मिलाया जा सकता है। कुछ प्रकार के जीवाणु केवल कुछ योजकों की उपस्थिति में ही विकसित हो सकते हैं। इसका उपयोग जीवाणु के अभियंत्रित उपभेद बनाते समय भी किया जा सकता है जिसमें प्रतिजीवाणु-प्रतिरोध जीन होता है। मिलाया जाता है, तो प्रतिरोध प्रदान करने वाले जीन युक्त केवल जीवाणु कोशिकाएं ही विकसित हो पाएंगी। यह शोधकर्ता को केवल उन कालोनियों का चयन करने की अनुमति देता है जो सफलतापूर्वक रूपांतरित हो गए थे।

आगर आधारित डिपस्टिक्स

अगार प्लेटों का लघु संस्करण डिपस्टिक प्रारूपों में लागू किया गया, उदाहरण के लिए डुबकी स्लाइड, अंकीय डिपस्टिक निदान उद्देश्यों के लिए देखभाल के बिंदु पर उपयोग किए जाने की क्षमता दिखाते हैं। अगार प्लेटों पर उनके फायदे हैं क्योंकि वे लागत प्रभावी हैं और उनके संचालन के लिए विशेषज्ञता या प्रयोगशाला वातावरण की आवश्यकता नहीं होती है, जो उन्हें देखभाल के बिंदु पर उपयोग करने में सक्षम बनाता है।

वेधन संवर्धन

गतिशील और गैर-गतिशील जीवाणु को वेधन लाइनों के साथ विभेदित किया जा सकता है। गतिशील जीवाणु वेधन लाइन से बाहर निकलेगा जबकि गैर-प्रेरक जीवाणु वेधन लाइन के साथ ही उपस्थित होते हैं।

वेधन संवर्धन अगार प्लेटों के समान हैं, लेकिन एक परखनली में ठोस अगार द्वारा बनाई जाती हैं। जीवाणु को एक टीका सुई या एक पिपेट टिप के माध्यम से अगार के केंद्र में वेधित किया जाता है। वेधित हिस्से में जीवाणु पनपते हैं। वेधन संवर्धन का सबसे अधिक उपयोग अल्पकालिक भंडारण या संवर्धनों के नौभार के लिए किया जाता है।

संवर्धन संग्रह

सूक्ष्मजीवीय संवर्धन संग्रह जीवाणु वर्गीकरण में अनुसंधान के लिए मानक संदर्भ सूक्ष्मजीवों, कोशिका वंशानुक्रम और अन्य पदार्थों की व्यवहार्य संवर्धनों के अधिग्रहण, प्रमाणीकरण, उत्पादन, संरक्षण, सूचीकरण और वितरण पर ध्यान केंद्रित करते हैं। संवर्धन संग्रह भी तनाव के भंडार हैं।

प्रमुख राष्ट्रीय संवर्धन संग्रह.

संग्रह परिवर्णी शब्द	नाम	स्थान
ATCC	अमेरिकी प्रकार का संवर्धन संग्रह	मनासास, वर्जीनिया
BCCM	सूक्ष्मजीवों का बेल्जियम समन्वित संग्रह	ब्रुसेल्स, बेल्जियम में विकेंद्रीकृत, समन्वय कक्ष
CCUG	संवर्धन संग्रह (गोथेनबर्ग विश्वविद्यालय)	गोथेनबर्ग, स्वीडन
CECT	कोलेसिओन एस्पनोला डे कल्टिवोस टिपो	वालेंसिया, स्पेन
CIP	डी' संस्थान पाश्चर संग्रह	पेरिस, फ्रांस
DSMZ	डॉयचे सैमलुंग वॉन मिकरूऑर्गेनिज्मेन और ज़ेलकल्चरन	ब्राउनश्विक, जर्मनी
ICMP	पौधों से सूक्ष्मजीवों का अंतर्राष्ट्रीय संग्रह	ऑकलैंड, न्यूज़ीलैंड
JCM	सूक्ष्मजीवों का जापान संग्रह	त्सुकुबा , इबारकी , जापान
NCTC	प्ररूप संवर्ध का राष्ट्रीय संग्रह	सार्वजनिक स्वास्थ्य इंग्लैंड, लंदन, यूनाइटेड किंगडम
NCIMB	औद्योगिक खाद्य और समुद्री बैक्टीरिया का राष्ट्रीय संग्रह	एबरडीन, स्कॉटलैंड

थर्मोफिलिक सूक्ष्मजीवों की ठोस प्लेट संवर्धन

50 से 70 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर बढ़ने वाले थर्मोफिलिक सूक्ष्मजीवों जैसे बैसिलस एसिडोकैल्डेरियस, बैसिलस स्टीरोथर्मोफिलस, थर्मस एक्वाटिकस और थर्मस थर्मोफिलिक सूक्ष्मजीवों की ठोस प्लेट संवर्धनों के लिए, कम एसाइल स्पष्ट गेलन गम अगार के लिए अगार की तुलना में पसंदीदा गेलिंग कर्मक साबित हुआ है। उपरोक्त थर्मोफिलिक जीवाणु की गिनती या विलगन या दोनों में साबित हुआ ।

विषाणु संवर्धन

Main article: विषाणु संवर्धन

विषाणु और फेज संवर्धनों को मेजबान कोशिकाओं की आवश्यकता होती है जिसमें विषाणु या फेज गुणा हो जाते हैं। बैक्टीरियोफेज के लिए, जीवाणु कोशिकाओं को संक्रमित करके संवर्धन किया जाता है। इसके बाद फेज को एक प्लेट पर जीवाणु के लॉन में परिणामी सजीले टुकड़े से अलग किया जा सकता है। वायरल संवर्धनों को उनके उपयुक्त यूकेरियोटिक मेजबान कोशिकाओं से प्राप्त किया जाता है। स्ट्रीक प्लेट विधि सूक्ष्मजीवीय आबादी को भौतिक रूप से अलग करने का एक तरीका है, और ठोस अगार प्लेट पर एक संरोपण पाश के साथ आगे और पीछे संरोपण फैलाकर किया जाता है। ऊष्मायन पर, कॉलोनियां उत्पन्न होंगी और बायोमास से एकल कोशिकाओं को अलग किया गया होगा। एक बार एक सूक्ष्मजीव को शुद्ध संवर्धन में अलग कर दिया गया है, इसे आगे के अध्ययन और संवर्धनों में उपयोग के लिए एक व्यवहार्य स्थिति में संरक्षित करना आवश्यक है जिसे स्टॉक संवर्धन कहा जाता है। इन संवर्धनों को बनाए रखना होगा, ताकि उनके जैविक, प्रतिरक्षात्मक और सांस्कृतिक चरित्रों का कोई नुकसान न हो।

यूकेरियोटिक कोशिका संवर्धन

Main article: कोशिका संवर्धन

शुद्ध संवर्धनों का विलगन

Main article: एक्सेनिक

एकल-कोशिका वाले यूकेरियोट्स के लिए, जैसे कि खमीर, शुद्ध संवर्धनों का विलगन जीवाणु संवर्धनों के लिए समान तकनीकों का उपयोग करता है। बहुकोशिकीय जीवों की शुद्ध संवर्धनों को प्रायः एक संवर्धन शुरू करने के लिए केवल एक व्यक्ति को चुनकर आसानी से अलग किया जाता है। उदाहरण के लिए, कवक, बहुकोशिकीय शैवाल और छोटे मेटाज़ोआ के शुद्ध संवर्धन के लिए यह एक उपयोगी तकनीक है।

प्रश्न में नमूने के अवलोकन के लिए शुद्ध संवर्धन तकनीकों का विकास महत्वपूर्ण है। अलग-अलग कोशिकाओं को अलग करने और एक शुद्ध संवर्धन का उत्पादन करने के लिए सबसे सामान्य तरीका एक स्ट्रीक प्लेट तैयार करना है। स्ट्रीक प्लेट विधि सूक्ष्मजीवीय आबादी को भौतिक रूप से अलग करने का एक तरीका है, और ठोस अगार प्लेट पर एक संरोपण पाश के साथ आगे और पीछे संरोपण फैलाकर किया जाता है। ऊष्मायन पर, कॉलोनियां उत्पन्न होंगी और जैव भार से एकल कोशिकाओं को अलग कर दिया जाएगा। एक बार एक सूक्ष्मजीव को शुद्ध संवर्धन में अलग कर दिया गया है, इसे आगे के अध्ययन और उपयोग के लिए व्यवहार्य अवस्था में संरक्षित करना आवश्यक है। स्टॉक संवर्धनों को बनाए रखना होगा, ताकि उनके जैविक, प्रतिरक्षात्मक और सांस्कृतिक चरित्रों का कोई नुकसान न हो।

यह भी देखें

• कॉलोनी बनाने की इकाई
• रक्त संवर्धन
• सूक्ष्मजीवीयडार्क मैटर
• सूक्ष्मजीवीयफूड संवर्धन
• स्क्रीनिंग संस्कृतियों
• थूक संवर्धन
• तुल्यकालिक संवर्धन
• गेलन गम

बाहरी संबंध

• EFFCA - European Food and Feed Cultutes Association. Information about production and uses of microbial cultures as well as legislative aspects.